色谱填充柱的填充剂是其中重要的部分，它通常是一种多孔吸附剂。填充剂的选择根据所需的分析目标和样品特性来进行。常用的填充剂包括吸附剂和分子筛。吸附剂是由高速液相色谱技术中吸附柱衍生而来，它可以根据样品的化学性质进行选择，例如常见的C18、C8和SiO2等。分子筛则是根据分子大小和形状来选择，如常用的葡萄糖胺、凯龙等。
填充柱中的填充剂具有大量的微小孔隙，这些孔隙可以吸附样品中的化合物。当样品进入填充柱后，填充剂表面的吸附作用会使得样品分子附着在填充剂表面，从而被层析分离。不同的化合物具有不同的亲合性和吸附能力，因此它们会以不同的速度通过填充柱进行分离。对于非极性化合物而言，它们往往被填充剂较强烈地吸附，因此会持留更长时间。而对于极性化合物而言，它们则往往很容易被填充剂释放，因此会持留时间较短。
填充柱的柱壁是填充剂的载体，它可以有效固定填充剂并提供合适的通道用于样品流动。柱壁的材料通常是不会与样品发生反应的无机、有机材料，如玻璃、不锈钢和聚酰胺等。柱壁的表面会被经过表面处理，增加填充剂的附着能力，从而提高分离效率。
填充柱还通常包含一层保护层，用于保护填充剂的稳定性和延长柱的使用寿命。保护层可以是化学惰性物质或具有特定的选择性物质。化学惰性物质例如聚硅氧烷，它可以减少填充剂与样品之间的非特异性吸附。而具有选择性物质的保护层，例如卡宾或酸类聚合物，可以通过特殊的相互作用来选择性地吸附和分离样品中的特定化合物。
色谱填充柱的应用主要包括以下几方面：
1.可用于对复杂混合物进行分离，如蛋白质、核酸等，以获取所需的目标化合物。
2.通过对填充柱中样品组分的峰面积或峰高进行定量分析，可以确定样品中目标物质的含量。
3.用于质量控制，确保产品的一致性和稳定性，如药品质量控制、食品安全等。
4.通过对填充柱中样品组分的保留时间和峰形进行分析，可以确定目标物质的结构和性质。
5.可以用于对复杂样品的成分进行分析，如环境样品中有机物的分析。
